您所在的位置： 66论文下载网 > 中医学论文 > 不同溶剂提取及初步纯化的金花茶叶提取物降血脂功能实验研究

作者：黄永林,陈月圆,文永新,李典鹏,梁荣感,韦霄　来源：66wen　更新时间：2009年09月01日　编 辑：admin

内容摘要：目的了解金花茶叶提取物降血脂效果。方法用高脂饲料饲喂鹌鹑15 d，造成鹌鹑高脂血症模型，然后分别灌胃(ig)给予金花茶叶提取物400 mg/kg，以临床降血脂药物非诺贝特片20 mg/kg为阳性对照，灌胃实验第30天后取血清测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。结果金花茶叶水提取物及初步纯化提取物均能降低鹌鹑高脂血症模型血清中的TC及TG含量，醇提取物只能降低高脂血症模型鹌鹑TC含量。结论金花茶叶提取物具有降低血脂作用并能用D101树脂富集。
金花茶Camellia nitidssima属山茶科山茶属植物，是常绿灌木至小乔木，是世界最珍贵的植物品种之一，有植物界的“大熊猫”“茶花皇后”之美誉［1］。据文献报道金花茶含天然有机锗、硒、锰、钼、钒、锌等十多种对人体有重要保健价值的微量元素及氨基酸、茶皂苷、黄酮类等多种生理活性成分［2，3］，具有清热解毒、利尿利湿等功效，常用于咽喉炎、痢疾、水肿、高血压病等疾病的治疗及肿瘤的预防［4］。药理研究表明，金花茶叶具有抑制肿瘤、抑菌、抗衰老、增强机体免疫、平行人体各种机能、增强心肌收缩力和血管弹性、增进肝脏代谢、降低胆固醇、降血压、激活人体各种酶等作用［5,6］。有文献报道了以大鼠为高脂血症模型对金花茶叶水提取物降脂功能的实验研究［7］，还未见有以鹌鹑为高脂血症模型对不同提取方法提取的金花茶叶提取物进行降血脂功能比较研究的报道，也未见有对其初步纯化提取物进行药理实验研究的文献资料。本实验比较了金花茶叶水、醇提取物及经D101大孔吸附树脂初步纯化提取物的降血脂功能，为进一步提取、分离纯化金花茶叶降血脂功效成分的研究奠定基础。

1 器材

1.1 材料金花茶(采集于广西植物研究所园内人工繁殖基地)；非诺贝特片（江苏济川制药有限公司）；丙基硫氧嘧啶（北京红惠生物制药股份有限公司）；胆固醇（南京新百药业有限公司）；猪油（市售）；TC和TG测试盒(上海生物工程有限公司)；D一101(天津农药厂)；异丙醇、乙酰丙酮、醋酸、硫酸等实验用试剂均为分析纯；市售鹌鹑，100～120 g，雌雄兼用。

1.2 仪器与设备722型分光光度计（上海精密科学仪器有限责任公司）；高速离心机（上海安亭科学仪器厂）。

2 方法

2.1 金花茶叶水提取物样品的制备将采集的金花茶叶阴干，粉碎过40目，分别用10，8倍纯净水提取两次（时间分别为2，1.5 h），合并提取液，放冷至室温，抽滤，合并滤液于真空下浓缩至浸膏，称重折算成每克稠膏的生药量，用纯净水稀释，待用。

2.2 金花茶叶乙醇提取物样品的制备将采集的金花茶叶阴干，粉碎过40目，分别用10，8倍80%乙醇回流提取两次（时间分别为2，1.5 h），合并提取液，放冷至室温，抽滤，合并滤液于真空下浓缩至稠膏（无醇味），称重折算成每克稠膏的生药量，用纯净水稀释，待用。

2.3 初步纯化后金花茶叶提取物样品的制备将金花茶叶水提取液放冷上已处理好的D101大孔树脂，充分用水洗至无色后用75%乙醇洗脱，收集乙醇溶液真空浓缩至浸膏（无醇味），称重折算成每克稠膏的生药量，用纯净水稀释，待用。

2.4 造模饲料的制备参照《中药药理实验方法学》［8］和《中药药理研究方法学》［9］中鹌鹑高脂血症模型造型法的配方（基础饲料+2%胆固醇+10%猪油+0.2%丙基硫氧嘧啶）。

2.5 动物的喂养取鹌鹑60只，雌雄兼用，随机分为6组：正常对照组、模型对照组、阳性对照组(非诺贝特片)、水提取物样品组、醇提取物样品组、初步纯化物样品组。每组10只动物，正常对照组每只给予基础饲料10 g/d，其余各组每只给予造模饲料（基础饲料+2%胆固醇+10%猪油+0.2%丙基硫氧嘧啶）10 g/d，15天后，在以上述方法喂养的同时各组灌胃给药，给药1次/d。

2.6 检测血清的制备实验在第30天给药后1 h断头取血，离心取上清液，放置冰箱，待用。

2.7 甘油三酯、总胆固醇的检测取“2.6”项血清用异丙醇抽提，分别用高铁－醋酸－硫酸显色法、乙酰丙酮显色法测定血清中总胆固醇、甘油三酯含量，实验数据用t检验进行统计学处理。

3 结果

由表1可见，鹌鹑高脂血症模型对照组血清中TC，TG含量与正常组比较均升高，经t检验，均具有显著的统计学意义。在相同的实验条件下，金花茶水提取物及初步纯化提取物组在设计剂量400 mg/kg（相当于生药量）与模型组比较均能降低鹌鹑血清中TC，TG含量，醇提取物组在设计剂量400 mg/kg（相当于生药量）能降低鹌鹑血清中TC含量，经t检验，均具有显著的统计学意义，醇提取物组在设计剂量400 mg/kg（相当于生药量）对TG含量的降低无统计学意义。表1 金花茶提取物对高脂血症鹌鹑血清TC，TG含量的影响

4 讨论

近年来随着人们物质生活水平的提高，高脂血症的发病率呈明显升高的趋势，膳食中饱和脂肪酸的摄入、饮酒、糖尿病等相关诱因与疾病均可增加血脂异常的发生率。本实验用高脂饲料饲喂鹌鹑建立鹌鹑高脂血症模型，与人类因膳食结构改变而形成的高脂血症相似，对人类高脂血症的研究具有指导意义。实验显示，金花茶叶水提取物及初步纯化提取物均能显著降低高脂血症鹌鹑血清中、甘油三酯（TG）含量，具有很好的降脂作用，金花茶叶醇提取物能显著降低总胆固醇（TC）含量，而对甘油三酯（TG）含量的影响没有显著意义。同时实验结果还显示，D－101树脂在富集金花茶叶中降脂功效物质的过程中有效成分几乎没有损失，是一种很好的富集材料。随着对金花茶叶降脂功效成分研究的不断深入，金花茶叶有望成为功能性食品以及保健品的新宠，因此，对不同提取方法及初步纯化的金花茶叶提取物降血脂功能进行实验研究具有重要的意义。

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